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上海飞测玉米赤霉烯酮免疫亲和柱

产品型号:

更新时间:2020-04-23

简要描述:

上海飞测玉米赤霉烯酮免疫亲和柱用于定性、定量检测谷物、酒类等食品和饲料等样本中的玉米赤霉烯酮时的样品前处理。

  【概要】

  玉米赤霉烯酮(Zearaleaone)又称F-2毒素,是玉米赤霉菌的代谢产物,具有雌激素样作用,具有较强的生zhi毒性和致畸作用,可引起动物发生雌激素亢进症, 导致动物不孕或liu产,对家禽、猪、牛和羊的影响较大,给畜牧业带来很大的经济损失。

玉米赤霉烯酮免疫亲和柱

  【适用范围及性能】

  用于定性、定量检测谷物、酒类等食品和饲料等样本中的玉米赤霉烯酮时的样品前处理。

  柱容量:≥500ng

  回收率:≥90%

  【试验原理】

  本产品的测定的基础是抗原抗体反应,玉米赤霉烯酮单克隆抗体连接在柱内凝胶上,样品中的玉米赤霉烯酮经过提取、过滤、稀释,然后将样品提取液缓慢的通过玉米赤霉烯酮免疫亲和层析柱,在免疫亲和柱内,玉米赤霉烯酮与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他物质。用甲醇洗脱玉米赤霉烯酮,然后注入到分析仪器中用于检测。

  【包装组成】

  根据不同规格,每一个盒中包含5/25支玉米赤霉烯酮免疫亲和层析柱及1份说明书。

  【需要而未提供的设备及试剂】

  设备:

  1. 高速均质器或组织匀浆机

  2. 粉碎机

  3. 200mL/50mL量筒

  4. 天平:感量0.1g

  5. 微量移液器:单道 100mL~1000mL

  6. 槽纹滤纸(折叠快速定性或定量滤纸)

  7. 玻璃微纤维滤纸(1.5mm孔径)

  8. 50mL漏斗

  9. 一次性玻璃试管

  10. 泵流操作架(包括空气泵,不同容积的玻璃注射器等)

  试剂:

  1. 甲醇(色谱级)

  2. 蒸馏水或去离子水

  3. pH7.0磷酸盐缓冲溶液(PBS缓冲液):称取8.0g氯hua钠,1.2g磷酸氢二钠,0.2g磷酸二氢钾,0.2g氯hua钾,用990mL纯水溶解,然后用浓盐酸调节pH值至7.0,最后用纯水稀释至1000mL

  【试剂配制】

  样品提取液:配制甲醇-水(8:2)溶液作为样品提取液

  【样本处理步骤】

  (一)花生,玉米,大米,小麦及其制品和饲料

  1. 称取50g粉碎的样品于100mL容量瓶中,加入5.0g氯hua钠,以样品提取液定容;

  2. 转移至均质杯中,在均质器上高速搅拌,提取2min;

  3. 4000r/min离心5min或用定量滤纸过滤;

  4. 取10mL滤液并加入40mLPBS缓冲液稀释,用玻璃微纤维滤纸过滤,取过滤后液体待测;

  5. 将免疫亲和柱连接于10.0mL玻璃注射器下。准确移取10.0mL样品提取液注入玻璃注射器;

  6. 将空气压力泵与玻璃注射器连接,调节压力使溶液以约1滴/S的流速缓慢通过免疫亲和柱,直至2~3mL空气通过柱体;

  7. 以10.0mL的PBS溶液和去离子水依次淋洗柱子1次,流速约为1-2滴/S,弃去全部流出液,并使2mL~3mL空气通过柱体;

  8. 准确加入1.0mL色谱级甲醇洗脱,流速为1 滴/S,收集全部洗脱液于玻璃试管中,供检测用。

  (二)啤酒,黄酒等酒类

  1. 取10mL试样脱气后与90mLPBS缓冲液混匀,用玻璃微纤维滤纸过滤,取过滤后液体待测;

  2. 将免疫亲和柱连接于10.0mL玻璃注射器下。准确移取10.0mL样品提取液注入玻璃注射器;

  3. 将空气压力泵与玻璃注射器连接,调节压力使溶液以约1滴/S的流速缓慢通过免疫亲和柱,直至2~3mL空气通过柱体;

  4. 以10.0mL的PBS溶液和去离子水依次淋洗柱子1次,流速约为1-2滴/S,弃去全部流出液,并使2mL~3mL空气通过柱体;

  5. 准确加入1.0mL色谱级甲醇洗脱,流速为1 滴/S,收集全部洗脱液于玻璃试管中,供检测用。

  【结果判定】

  经免疫亲和柱净化后,收集到的甲醇洗脱液可直接使用荧光计或者HPLC检测,也可使用薄层色谱或者酶联免疫试剂盒进行检测。收集到的1mL洗脱液中的玉米赤霉烯酮含量相当于1g样品中玉米赤霉烯酮含量。

  【注意事项】

  1. 玉米赤霉烯酮危害很大,应戴手套操作;

  2. 不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。

  【贮藏条件及保存期】

  贮藏条件:亲和柱可于常温保存,2-8℃储存可延长有效期,不可冻存。

  保存期:该产品有效期为12个月。

 

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