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呕吐毒素免疫亲和柱,回收率高柱容量大

产品型号:FD-C31

更新时间:2020-04-08

简要描述:

呕吐毒素免疫亲和柱,回收率高柱容量大,适用于谷物、饲料等样本中的DON净化处理,提高了样品的纯度,纯化后的提取液可用不同的分析方法测定。

  【产品用途】

  呕吐毒素(DON)免疫亲和柱适合于和DON酶免分析试剂盒、HPLC或液质结合使用,定量检测DON。适用于谷物、饲料等样本中的DON净化处理,提高了样品的纯度,纯化后的提取液可用不同的分析方法测定。

呕吐毒素免疫亲和柱

  【测定原理】

  本产品测定的基础是抗原抗体反应,呕吐毒素(DON)单克隆抗体连接在柱内凝胶介质上,样品中的DON经过提取、过滤、稀释,然后将样品提取液缓慢通过DON免疫亲和柱,在免疫亲和柱内,DON与抗体结合,洗涤液通过免疫亲和柱除去未被结合的杂质。最后采用甲醇洗脱DON,然后进行相关分析。

  【样品制备及净化】

  ----准确称取25.0g粉碎的样品,加入5g聚乙二醇8000,并与125mL水混合,以均质器高速搅拌提取2min或振荡提取30min,

  ----用快速定性滤纸过滤,并用玻璃微纤维滤纸过滤,至滤液澄清,备用。

  【亲和柱净化】

  注意:整个纯化过程尽量不要让柱子干燥!

  ----将柱子上方堵头取出后斜剪断,然后再插回柱子上;

  ----将20mL注射器连接于免疫亲和柱上部,用5~10mL pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)或者去离子水平衡柱子,以1滴/秒的速度缓慢通过免疫亲和柱,(用注射器加以正压或用真空泵施加负压,也可以使用泵流操作架配合免疫亲和柱);

  ----准确移取2mL上述滤液(相当于0.4g样品)注入注射器中,调节针筒压力使其以1滴/2秒的速度缓慢通过免疫亲和柱;

  ----用20mL 水冲洗柱子,弃去流出液,流速1滴/秒,直至2~3mL空气通过柱体,保证柱子内没有残余液体;

  ----准确加入1.0mL色谱级甲醇洗脱,流速1滴/2~3秒,直至2~3mL空气通过柱体,保证柱子内没有残余液体。收集全部洗脱液,可根据实际测定条件进行稀释或氮气吹干后流动相定容,再进行相关测定。

  【注意事项】

  (1)呕吐毒素对人体有害,应戴手套操作。凡接触到标样的玻璃器皿都要用5%次氯酸钠浸泡过夜。

  (2)不要使用过有效期的免疫亲和柱。

  (3)免疫亲和柱应在2~8℃保存。不要冷冻。

  (4)使用前,免疫亲和柱需至少提前半小时回温至室温(25℃左右)。

  (5)HPLC液相测定值、试剂盒计算值接近zui高检出值时,样本的实际含量可能大于柱容量而造成流穿,建议减少上样体积重新过柱。

  (6)称取的样品量以及提取液的体积可根据实际情况按比例调整,建议最低不少于10g样。

  温馨提示:不可用于临床治疗。

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