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玉米赤霉烯酮免疫亲和柱,回收率高重复性好

产品型号:

更新时间:2020-04-14

简要描述:

上海飞测玉米赤霉烯酮免疫亲和柱,回收率高重复性好,适用于粮食及粮食制品、食品、饲料等样本中的ZEN净化处理,提高了样品的纯度,纯化后的提取液可用不同的分析方法测定。

  【适用范围及性能】

  玉米赤霉烯酮免疫亲和柱适用于粮食及粮食制品、食品、饲料等样本中的ZEN净化处理,提高了样品的纯度,纯化后的提取液可用不同的分析方法测定。

  柱容量:≥1500ng

玉米赤霉烯酮免疫亲和柱

  【试验原理】

  玉米赤霉烯酮免疫亲和柱基于抗原抗体特异性反应,将玉米赤霉烯酮抗体偶联与柱内凝胶上,样品提取液通过免疫亲和柱时,提取液内待测毒素(抗原)与抗体特异性结合,形成抗体抗原复合物保留在柱内凝胶上,洗涤出去杂质,用邮寄溶剂解离复合物,洗脱纯净待测毒素用于分析检测。

  【结果判定】

  经玉米赤霉烯酮免疫亲和柱净化后,收集到的甲醇洗脱液可直接使用荧光计或者HPLC检测,也可使用薄层色谱或者酶联免疫试剂盒进行检测。收集到的1ml洗脱液中的玉米赤霉烯酮含量相当于1g样品中玉米赤霉烯酮含量。

  玉米赤霉烯酮亲和柱净化过程

  ----3mL柱管取出上方堵头,减去上堵头螺纹下突出部分,插回柱子上(1mL柱管上方堵头取出后斜 剪断,然后再插回柱子上),另一端与20mL针筒固定后使用;

  ----准确移取上述混匀滤液,注入针筒中,调节针筒压力使其以2秒/滴的速度缓慢通过免疫亲和柱;

  ----用20mL 水冲洗柱子,流速1秒/滴,弃去流出液,直至2~3mL空气通过柱体,保证柱子内没有残余 液体;

  ----准确加入2mL甲醇(色谱级)洗脱,流速自然重力,直至2~3mL空气通过柱体,保证柱子内没有 残余液体。收集全部洗脱液;

  ----过有机滤膜(孔径0.22μm)后,进行HPLC测定;或用氮气吹干,经流动相复溶,过有机滤膜 (孔径0.22μm)后,参照GB 5009.209-2016或GB/T 28716-2012条件进行HPLC测定。

玉米赤霉烯酮免疫亲和柱检测流程

  玉米赤霉烯酮亲和柱净化过程注意事项

  1. 亲和柱使用前,需要提前平衡30min至室温;

  2. 亲和柱与20mL针筒连接时,一定旋紧20mL针筒与堵头连接处,防止上样过程漏液;

  3. 采用大量程移液器准确移取混匀滤液进行上样;样液流过柱体的速度不能过快,采用固相萃取架过柱 时可以调节流速为2秒/滴,若无此设备,自然重力流速也可;

  4. 冲洗柱子时保持自然重力流速即可;对于酱油、醋、油类、玉米加工副产物及饲料等颜色较深的样品, 可以先用10mL 0.1%吐温20-PBS清洗,再用10 mL 10%甲醇-水冲洗,最后用10mL水冲洗柱子;

  5. 柱子冲洗过后一定要用洗耳球吹干柱子内残余的液体,但不能让柱子干燥时间过长,要立即加入洗脱 液;

  6. 采用玻璃移液管准确移取2mL色谱级甲醇进行洗脱,自然重力流速即可(不可施压),最后一定要用 洗耳球吹干柱子内残余的甲醇,收集全部洗脱液;

  7. 洗脱液必需先经过0.22μm滤膜过滤才能进行HPLC测定;

  8. HPLC测定值接近zui高检出值时,样本实际含量可能大于柱容量而造成流穿,需减少上样体积。

玉米赤霉烯酮免疫亲和柱特点

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